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人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)說明書.doc
發(fā)布時(shí)間:2025/8/18瀏覽:43次
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  一、產(chǎn)品基本信息

  BS-0245人可溶性粘附分子(Sam)ELISA試劑盒

  檢測(cè)原理

  采用雙抗體夾心ELISA法:

  預(yù)包被單克隆抗體捕獲樣本中SAM抗原

  生物素標(biāo)記多克隆抗體作為檢測(cè)抗體

  TMB顯色系統(tǒng)(450nm測(cè)定)實(shí)現(xiàn)定量分析

  試劑盒組成

  組分規(guī)格/說明

  預(yù)包被微孔板96孔/板(可拆卸)

  SAM標(biāo)準(zhǔn)品0-1000pg/ml梯度濃度

  生物素標(biāo)記抗體100×濃縮液

  HRP-親和素結(jié)合物100×濃縮液

  TMB底物液避光保存

  終止液2Mliusuan溶液

  二、實(shí)驗(yàn)操作流程

  樣本預(yù)處理

  血清/血漿:EDTA抗凝,1000×g離心15分鐘

  細(xì)胞上清:去除沉淀后-70℃分裝保存

  標(biāo)準(zhǔn)曲線制備

  步驟參數(shù)

  稀釋標(biāo)準(zhǔn)品按1:3梯度稀釋(建議7個(gè)濃度點(diǎn))

  加樣量每孔100μl

  孵育條件37℃ 60分鐘

  檢測(cè)步驟

  1. 加樣:標(biāo)準(zhǔn)品/樣本→生物素抗體→HRP結(jié)合物 2. 洗滌:PBST緩沖液洗板5次(每次浸泡30秒) 3. 顯色:TMB避光反應(yīng)15分鐘→終止液終止

  三、質(zhì)量控制要求

  指標(biāo)可接受標(biāo)準(zhǔn)

  標(biāo)準(zhǔn)曲線R2值≥0.990

  板內(nèi)CV≤10%

  板間CV≤15%

  回收率85-115%

  四、注意事項(xiàng)

  關(guān)鍵操作

  避免反復(fù)凍融標(biāo)準(zhǔn)品(建議分裝儲(chǔ)存)

  顯色時(shí)間需精確控制(±30秒誤差)

  安全警示

  終止液具有強(qiáng)腐蝕性(需佩戴護(hù)目鏡)

  廢液需用10%NaOH中和后處理

  數(shù)據(jù)判讀

  建議使用四參數(shù)擬合算法(4PL)

  溶血/脂血樣本需備注說明

  注:以上資料僅供參考,具體請(qǐng)咨詢品牌供應(yīng)商或技術(shù)老師。

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